Innhold
- stadier
- Metode 1 Observer bakteriene direkte
- Metode 2 Måling av biomasse
- Metode 3 Fortsett med turbidimetri
Det er flere måter å måle bakterievekst på, og noen er vanskeligere enn andre å implementere. De enkleste brukes ofte og gir relativt nøyaktige resultater, forutsatt at de er strenge under målinger. De vanligste teknikkene er observasjon og telling av bakterier, måling av biomasse og tørr biomasse og turbidimetri. Skolelaboratoriet ditt bør ha utstyret som trengs for minst en av disse metodene.
stadier
Metode 1 Observer bakteriene direkte
-
Forbered utstyret. I tillegg til hva som vanligvis finnes i alle biologilaboratorier, trenger du noen spesifikke elementer. Forsikre deg om at du har alle instrumenter og containere til hånden, så du slipper å gå frem og tilbake i skapet der utstyret er lagret. Tenk foran hva du vil gjøre for å vite hva du vil bruke på hvert trinn. Du må også kjenne til noen viktige begrep.- Få et hemacytometer. Det er et blad med kamre med nummerering som er assosiert med et mikroskop. Det er et veldig enkelt instrument å justere og bruke. Du kan finne noen fra leverandører som spesialiserer seg på utstyr til skoler og forskningslaboratorier. En brukermanual er vanligvis gitt.
- Ta en petriskål. Dette er en liten, rund, grunt beholder der du kan observere bakterier.
- Begrepet "kultur" refererer til en mikroorganisme som kunstig forplantes som en del av et vitenskapelig eksperiment.
- "Kulturbuljongen" er mediet kulturen vil utvikle seg i.
-
Bruk petriskålen. Sett bakteriene i boksen og observer den under et mikroskop. Du kan også legge den direkte på et lysbilde. Tell deretter antall bakterieceller som er til stede. -
Forsikre deg om at du har riktig konsentrasjon. Hvis det er for mye bakterier, vil de overlappe hverandre, og du vil ikke kunne telle dem riktig. Hvis dette er tilfelle, fortynn kulturen ved å blande den med litt buljong. Hvis det er for få, blir ikke resultatet betydelig. Du må deretter filtrere buljongen for å øke konsentrasjonen. -
Telle bakteriene. Det siste trinnet er ganske enkelt å telle. Se på tellekamrene under mikroskopet og noter antall celler du ser. Sammenlign resultatet med andre lignende opplevelser.
Metode 2 Måling av biomasse
-
Sjekk at du har de nødvendige instrumentene. Denne metoden er treg å implementere og innebærer bruk av dyrt utstyr. Hvis du ikke vasker det, bruk en annen teknikk. På den annen side, hvis laboratoriet du er i har riktige verktøy, er målingen av biomasse og tørr masse ideell fordi det gir nøyaktige resultater. Du trenger:- en hydraulisk ovn med tvungen konveksjon,
- en veiing av aluminium,
- flere Erlenmeyer-kolber,
- en sentrifuge eller et laboratoriefiltreringssystem.
-
Sjekk at avlingen er i en Erlenmeyer-kolbe. Hvis dette ikke er tilfelle, hell det inn. På dette stadiet av eksperimentet er bakteriene fremdeles i kulturbuljongen. De blir separert senere. -
Tørk vektpannen. For dette, sett den i ovnen. Du kan også bruke et celluloseacetatmembranfilter med en diameter på 47 mm med porene på 0,45 um. Uansett hvilket verktøy som brukes, måler du massen nøyaktig slik at den kan trekkes fra resultatene du får når avlingen legges på den. -
Mix. Rør lerlenmeyer slik at kulturen er homogen. På grunn av tyngdekraften har cellene naturlig en tendens til å falle til bunnen av beholderen. Så du må riste litt for hvilke som er fordelt på en ensartet måte og at prøven din er mer representativ. -
Sentrifuge. Ved å bruke sentrifugen, skiller du bakteriene fra kulturbuljongen. Denne enheten brukes til å vri containeren og en motvekt i veldig høy hastighet. Buljongen flyter, som bare holder levende materie. For mer informasjon, vil du finne informasjon om hvordan du bruker en sentrifuge på internett. -
Få deigen. Slipp den på vei. Du kan kaste kulturbuljongen, du vil ikke trenge den lenger, men hold lerlenmeyer på hånden. -
Skyll sentrifugen. Hell skyllevannet på vei i tillegg til bakteriecellene. Resultatet oppnådd for alt gir deg biomasse. -
Finn den tørre massen. For å kjenne til den tørre biomassen til prøven din, plasser veiepannen i ovnen satt til 100 ° C i en periode på 6 til 24 timer, i henhold til instruksjonene som fulgte med enheten. Vær forsiktig så du ikke overskrider denne temperaturen for å unngå å brenne bakterier. Vei deretter alt, og trekk deretter massen på brettet.
Metode 3 Fortsett med turbidimetri
-
Forbered utstyret ditt. Du trenger en lyskilde og et spektrofotometer, en enhet som finnes i de fleste vitenskapslaboratorier. Se den medfølgende bruksanvisningen da hver modell har sin egen drift. Denne metoden er en av de mest brukte for å måle bakterievekst, da den bare krever rimelige og brukervennlige verktøy. -
Ta med lys inn i kulturen. Turbiditet brukes til å evaluere innholdet av en væske i partikler, det utgjør for å bestemme om det er mer eller mindre skyet. Resultatet du får fra denne målingen vil bli gitt i NTU (eller Nephelometric Turbidity Units). Det kan være nødvendig å utføre en kalibrering av anordningen for å måle prøvens uklarhet nøyaktig. -
Ta notater. Turbiditet er mengden bakterier i prøven. Spektrofotometeret vil også gi deg mulighet til å kjenne til overføringen til løsningen (% T), hvis verdi er omvendt proporsjonal med verdien til uklarhet. Sammenlign deretter resultatene som er oppnådd på forskjellige prøver for å måle bakterievekst.